Kako liofilizacija štiti biološki materijal

Liofilizacija, također poznata kao sušenje zamrzavanjem, postupak je koji se koristi za očuvanje biološkog materijala uklanjanjem vode iz uzorka, što uključuje prvo zamrzavanje uzorka i zatim sušenje pod vakuumom pri vrlo niskim temperaturama. Liofilizirani uzorci mogu se čuvati mnogo duže od neobrađenih uzoraka.

Zašto se upotrebljava liofilizacija?

Liofilizacija ili sušenje zamrzavanjem bakterijskih kultura stabilizira kulture za dugotrajnu pohranu dok smanjuje štetu koju može uzrokovati strogo sušenje uzorka. Mnogi mikroorganizmi dobro preživljavaju kada se liofiliziraju i mogu se lako rehidrirati i uzgajati u mediju za kulturu, nakon produženih vremenskih razdoblja u skladištenju.

Liofilizacija se također koristi u biotehnološkoj i biomedicinskoj industriji za očuvanje cjepiva, uzoraka krvi, pročišćenih proteina i drugih bioloških materijala.

Ovaj kratki laboratorijski postupak može se koristiti s bilo kojim komercijalno dostupnim zamrzivačem za očuvanje vaše kolekcije kulture.

Proces liofilizacije

Proces liofilizacije zapravo je primjena fizičkog fenomena pod nazivom sublimacija: prijelaz tvari iz krutog u plinovitu, bez prve prolaska kroz tekuću fazu. Tijekom liofilizacije, voda u zamrznutom uzorku se uklanja kao vodena para, bez prethodnog odmrzavanja uzorka.

Uobičajene pogreške

Jedna od najčešćih pogrešaka kada je riječ o liofilizaciji nije poznavanje točke taljenja vašeg uzorka, što otežava odabir ispravnog liofilizatora. Vaši uzorci mogu se rastopiti tijekom procesa. Druga uobičajena pogreška je da je hladnija zamrzavanje bolja kada se osuši smrzavanjem na polici za zamrzavanje. Tijekom primarnog sušenja trebali biste postaviti temperaturu police na samo ispod eutektonske temperature uzorka. Mora postojati dovoljno vrućine da potaknu molekule uzorka da se sele - ali sprječavaju topljenje.

Treća pogreška koristi pogrešnu opremu za vaše uzorke. Budući da se sušilice za zamrzavanje koriste u skupnom okruženju, trebate znati sljedeće prije kupnje:

• Koliko će vlaga biti liofilizirana
• Što je uzorak (i ​​eutektička temperatura)
• Kako pravilno koristiti zamrzivač

Ako se jedinica ne koristi ispravno, može uništiti sve uzorke. Što nas dovodi do neke druge uobičajene pogreške: ne održavanje vakuumske pumpe. Crpka mora biti u izvrsnom radnom stanju kako bi liofilizacija radila. Pokretanje crpke s plinovitim balastom otvorenim 30 minuta prije i nakon sušenja zamrzavanjem povećat će trajanje crpke. Otvaranje balasta za plin čisti kontaminante izvan pumpe kako bi se spriječilo oštećenje unutarnjih komponenti. Često treba provjeriti ulje pumpe za obezbojenje i čestice, te mijenjati ulje po potrebi.

Redovita mijenja ulja zadržavaju pumpu povlačenjem pod optimalnim vakuumom tijekom sušenja zamrzavanjem.

Konačno, imaju krivi zamrzavanje za sušenje pribor za vaš proces liofilizacije također može biti velika pogreška. Trebate uzorak zaustavljača pod vakuumom? Zatim je potrebna zaustavna komora. Jeste li zamrzavanjem u bočicama? Zatim pazite da imate komoru za sušenje s otvorima.

Izbjegavajući gore navedene pogreške, možete pružiti bolju brigu o vašem sušilici za zamrzavanje i pumpi i imati bolje uzorke kada završite sa sušenjem zamrzavanjem.

_Reference

_{Labconco vijesti. "Top 5 grešaka u procesu liofilizacije." http://www.labconco.com/news/top-5-lyophilization-mistakes}